Скачать

Н.С.Монтаева, К.Ж.Кушалиев

 Западно-Казахстанский аграрно-технический университет им. Жангир хана,
г. Уральск, Казахстан

Аннотация. В данной статье представлены новые  результаты исследования на собаках поступивших с опухолевыми заболеваниями в ветеринарные клиники города Уральска. Исследования проведены впервые в условиях Казахстана. Отличительной особенностью научно-методической значимости статьи является то, что диагноз меланома доказана не только с учетом клинических признаков, но и с использованием гематологических, цитологических и гистологических результатов научных исследовании.
Ключевые слова: меланома, онкология, меланоцитома, опухоль, биопсия, метастаз

___________________________

Монтаева  Н.С., Кушалиев К.Ж.
МЕЛАНОМАМЕН АУРУ ИТТЕРДІ АМБУЛАТОРИЯЛЫҚ ЗЕРТТЕУЛЕР БАРЫСЫНДА КЛИНИКАЛЫҚ БЕЛГІЛЕРІН, ЦИТО ЖӘНЕ ПАТОМОРФОЛОГИЯЛЫҚ ӨЗГЕРІСТЕРІН АЙҚЫНДАУ

 Түйіндеме. Аталған мақалада Орал қаласының ветеринарлық клиникасына ісік ауруларымен түскен иттерге жүргізілген зерттеулердің жаңа нәтижелері ұсынылған. Зерттеулер Қазақстан жағдайында алғаш рет жүргізілді. Мақаланың ғылыми-әдістемелік маңыздылығы зерттелу объектілеріне  меланома диагнозы клиникалақ белгілерімен қоса гематологиялық, цитологиялық, гистологиялық зерттеулер нәтижелеріне сүйене отырып дәлелденгенімен ерекшеленеді.
Түйінді сөздер: меланома, онкология, меланоцитома, ісік, биопсия, метастаз

__________________________

Montaeva N.S., Kushaliev K.Zh.
CLINICAL SIGNS, CYTO AND PATHOLOGICAL CHANGES,  REVEALED BY OUTPATIENT EXAMINATION OF DOGS MELANOMA PATIENTS

Abstract. This article presents the results of new results on dogs who received to veterinary  clinics in Uralsk with neoplastic diseases. Investigations were carried out first in Kazakhstan. A distinctive feature of scientific and methodical significance of this paper is that the diagnosis of melanoma is proved not only in view of clinical signs but with hematological, cytological and histological results of scientific research.
Key words: melanoma, oncology, melanocytoma, tumor, biopsy, metastasis.

Введение. В клинической онкологии одной из самых сложных проблем является своевременная диагностика меланомы кожи.

Меланома (синонимы — меланобластома, меланоцитома, невокарцинома, меланокарцинома) относится к категории наиболее агрессивных опухолей, метастазирующих как лимфогенным, так и гематогенным путем [1].

Несмотря на то, что частота меланомы составляет 3-5% от всех первичных злокачественных опухолей кожи, она остается главной причиной смерти больных в онкодерматологии [2].

За последние 20 лет большинство исследователей отмечает устойчивый рост заболеваемости меланомы во всех регионах мира. Так, стандартизированные показатели заболеваемости удваиваются каждые 10 — 15 лет, ежегодно возрастая на 7% [3].

В России с 1992 по 1999гг. стандартизованный показатель заболеваемости  составил 30%, уступая лишь раку щитовидной и предстательной желез [4].

Показатели своевременной диагностики меланомы в настоящее время трудно признать удовлетворительными, несмотря на доступность опухоли к обследованию и возможность для визуального распознавания. Точность клинической диагностики врачами первого звена при первичном обращении составляет 37% [5].

У 32,5 % больных меланома кожи выявляется в Ш-1У стадии, что резко ухудшает прогноз и не позволяет надеяться на успешное излечение [6].

В последние годы в связи с реализацией современных возможностей ранней диагностики мнение о меланоме, как об опухоли с непременным фатальным исходом пересматривается [7].

Последние три десятилетия в ряде стран Западной Европы, Австралии и США ознаменовались значительными успехами в диагностике меланомы на ранних стадиях развития. В США возросло число так называемых «тонких» меланом, толщиной менее 1 мм: с 11% в 1970 году до 57,7% в 1979 году [8].

В Казахстане и в ряде стран Восточной Европы проблеме ранней диагностики меланомы кожи пока еще не уделяется должного внимания. Так, по данным исследований в странах Западной Европы [9] с 1978 по 1992 было выявлено в два раза больше случаев поверхностно-распространяющейся МК (I-II стадия) по сравнению со странами Восточной Европы.

В настоящее время одним из наиболее известных клинических симптомокомплексов, используемых в диагностике меланомы, является правило ABCD (А — ассиметрия пигментного пятна; В — неровность границ; С — неравномерность окраски; D — диаметр более 6 мм), предложенное Friedman в 1985 году [10].

Однако, как указывают авторы данного симптомокомплекса при его использовании врачами, не имеющими достаточного опыта и специализированной подготовки в онкодерматологии, возможна неправильная его оценка, неверная интерпретация набора признаков и, как следствие, диагностические ошибки.

За последние 20 лет в отечественной литературе представлено подробное описание различных дополнительных диагностических методик для выявления и стадирования меланомы: цитологическое исследование мазков-отпечатков с поверхности опухоли, радиофосфорная индикация, термография и термометрия, рентгенологическое исследование зоны, опухоли, рентгено-контрастная и радиоизотопная лимфография, реакция Якша, определение потенциального электрического сопротивления тканей и другие [11].

Ряд авторов считает, что комплексное использование нескольких указанных методик исследования, достоверно повышает точность диагностики. В тоже время; значительная» часть специалистов- в онкодерматологии неоднозначно оценивает эффективность указанных методик при выявлении меланомы. В полном комплексе данные методики обследования лиц с пигментными новообразованиями кожи редко используются и имеют мало перспектив для внедрения в повседневную клиническую практику. В первую очередь это связано со сложностью указанных диагностических процедур, неоднозначностью интерпретации полученных данных, низкой специфичностью и высоким процентом ложно-положительных результатов (от 32% до 70%).В последние годы ведется активный поиск более эффективных неинвазивных методов ранней диагностики меланомы, к которым относятся: эпилюминисцентная микроскопия (дерматоскопия), инфракрасная спектроскопия, конфокальная лазерная микроскопия, высокочастотный ультразвук, оптическая когерентная томография, флуоресцентная диагностика [12].

Методы исследований. Диагностика меланом  у собак проводилась на основании данных физикального обследования животных, гематологических, цитологических и гистологических исследований. Материал для цитологических исследований получали с помощью пункционной биопсии, которую выполняли шприцем объемом 10 или 20 мл и иглой диаметром 0,8 мм. Для получения оптимального результата взятие материала осуществлялось в нескольких участках исследуемой массы и на разной глубине. После получения образца ткани или жидкости их выдавливали на предметное стекло и готовили тонкие мазки, которые перед отправкой в лабораторию высушивали на воздухе и маркировали.

Цитологическому исследованию также подвергали смывы жидкости и эксфолиативных клеток и мазки-отпечатки. Жидкости получали промыванием поверхности опухоли 0,9%-ным раствором натрия хлорида или путем сбора торакальных и абдоминальных выпотов при перитонеальном дренировании или торакоцентезе. Собранные жидкости помещали в контейнер с ЭДТА и отправляли в лабораторию.

Мазки-отпечатки получали путем прикладывания предметного стекла к изъязвленной поверхности опухоли, предварительно промокнув ее, бумажной салфеткой для удаления излишней жидкости.В лаборатории жидкие образцы центрифугировали 2-4 минуты со скоростью 2000 об/мин. Надосадочную жидкость удаляли пипеткой, каплю осадка наносили на предметные стекла, готовили мазки. Мазки окрашивали по методу Паппенгейма.

Для гистологических исследований материал получали с помощью инцизионной и эксцизионной биопсии. Полученный материал, в том числе все оперативно удаленные органы и ткани, фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина. Для получения гистологических срезов использовали парафиновую заливку. Применяли метод окраски срезов гематоксилином и эозином. Более детальная характеристика, дифференциальная диагностика и выявление тканевой принадлежности требовали применение методик, позволяющих обнаружить липиды, гликозаминогликаны, волокнистые структуры (по Масону, по Гольдману, по Ван-Гизону).

Результаты и обсуждение. За период с сентября по январь 2013 г. в ветеринарных клиниках АО «Талап», ИП «Винникова» и  при НИВСе питомник для временного содержания собак было обследовано   35 собак . Из них спонтанные опухоли различной локализации были обнаружены у 19 собак (54.2% от общего числа обследованных собак). Полному обследованию, включая гематологические, цитологические, гистологические подвергнуто 19 собак.

Из выявленного нами и подтвержденного патоморфологически 19 случая новообразований 10 опухоль оказалась злокачественной, а 9 — доброкачественными. Таким образом, 52.6% всех опухолей составили злокачественные новообразования, а 47.3% — доброкачественные. (таблица).

Частота заболеваемости спонтанными опухолями собак

 Из двух случаев обнаружения нами меланомы у собак  одна была локализована на голове, другая — на конечности. На голове  меланома была обнаружена в коже ушной раковины. Это было небольшое (около 1 см в диаметре), плотное, неподвижное образования, телесного цвета. На разрезе опухолевые узлы были представлены мягко-эластичной тканью серовато-желтого цвета. В первом случае гистологически была установлена невоклеточная меланома с очень низким содержанием пигмента (практически беспигментная), IV уровня инвазии. На конечности мы наблюдали меланому у кобеля 6 лет породы ризеншнауцер (рис. 2). Опухоль была локализована вокруг когтя, имела вид грануляционной ткани и плотную консистенцию. На разрезе была представлена блестящей гомогенной черной тканью, доходящей до участка костной ткани.

Гистологически была установлена эпителиоидноклеточная изъязвившаяся меланома с очень высоким содержанием меланина, V уровня инвазии (рис. 1).

Рис. 1. Плоскоклеточный ороговевающий рак кожи с крупными очагами некроза, изъязвлением эпидермиса
и плотной очаговой лимфоплазмоцитарной инфильтрацией, Гистопрепарат.
Собака породы ризеншнауцер, кобель, 6лет. Окраска гематоксилином и эозином

Меланома происходит из злокачественно трансформированных меланоцитов (пигментобразующих клеток, локализующихся в эпидермисе). При гистологическом исследовании опухоль характеризуется выраженным полиморфизмом клеток и ядер. Клетки могут быть крупного размера, округлые, полигональные, мелкие, веретенообразные и т.д. Ядра полиморфные, часто с крупной вакуолью. Митозы атипичные, обычно многочисленные. В цитоплазме присутствует меланин, но в некоторых случаях меланин не определяется, что значительно затрудняет дифференциальную диагностику. Клетки меланомы могут складываться в солидные поля, альвеолы, тяжи. Степень злокачественности зависит от уровня инвазии по Кларку (от I — в пределах эпидермиса до V — опухоль прорастает в подкожную жировую клетчатку) (рис.2).

 Рис. 2. Плоскоклеточный ороговевающий рак кожи.
Остеолиз дистальной части фаланг показан стрелкой.
Собака породы ризеншнауцер,  кобель, 6 лет.

Заключение. Полному обследованию, включая гематологические, цитологические, гистологические было подвергнуто 35 собак. Из выявленного нами и подтвержденного патоморфологически 19 случая новообразований 10 опухоль оказалась злокачественной, а 9 — доброкачественными. Таким образом, 52.6% всех опухолей составили злокачественные новообразования, а 47.3% — доброкачественные.

Из двух случаев обнаружения нами меланом у собак  она была локализована на голове, у другого — на конечности. На голове  меланома была обнаружена в коже ушной раковины. Это было небольшое (около 1 см в диаметре), плотное, неподвижное образования, телесного цвета. На разрезе опухолевые узлы были представлены мягко-эластичной тканью серовато-желтого цвета. В первом случае гистологически была установлена невоклеточная меланома с очень низким содержанием пигмента (практически беспигментная), IV уровня инвазии. На конечности мы наблюдали меланому у кобеля 6 лет породы ризеншнауцер.Опухоль была локализована вокруг когтя, имела вид грануляционной ткани и плотную консистенцию. На разрезе была представлена блестящей гомогенной черной тканью, доходящей до участка костной ткани.

Список литературы

1       Снарская Е.С., Молочков В.А. Базалиома. Медицина — 2003. 136с.

2      Пожарисский K.M., Кудайбергенова А.Г., Леенман Е.Е. Патоморфологическая характеристика и особенности меланомы кожи. Прогностические факторы // Практическая онкология, № 4, том 8, 2001, с. 23-29.

3      Goldman L. A simple portable skin microscope for surface microscopy. Arch1. Dermatol 1958; 78:246-7.

4       Демидов В.П. и соавт. Лечение больных с меланомой кожи туловища иконечностей I и II клинической стадии. /I Методические рекомендации. МНИОИим.П.А.Герцена — Москва, 1998.- 14 с.

5       Александров H.H. Бесконтактная дистанционная пирометрия иприменение гипертермии и гипергликемии в комплексном лечении злокачественных новообразований / H.H. Александров, Н.И. Зацепин, Е.Г. Маршинков.-Минск, 19S4.-C. 200-209.

6       Галилоглы Г.А., Молочков В.А., Сергеев Ю.В. Дерматоонкология. Медицина для всех 2005 — 872с.

7      Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественныхновообразований в России и странах СНГ в 2005 году. // Вестник РОНЦРАМН им. Н.Н.Блохина -2007 Т. 18, Ш(прил.1) — С. 156.

8      27. Снарская Е.С., Молочков В.А. Базалиома. Медицина — 2003 136с.

9       Schindewolf T, Stolz W, Albert R, et al. Comparison of classification rates for conventional and dennatoscopic images of malignant and benign melanocytic lesions using computerized colour image analysis. EurJ Dermatol 1993;3:299-303.

10   Coory M, Baade P, Aitken J, Smithers M, McLeod GR, Ring I. Trends for insitu and invasive melanoma in Queensland, Australia, 1982-2002. // Cancer Causes Control. 2006Feb;17(l):21-7.

11   Александров H.H. Бесконтактная дистанционная пирометрия иприменение гипертермии и гипергликемии в комплексном лечении злокачественных новообразований / H.H. Александров, Н.И. Зацепин, Е.Г. Маршинков.-Минск, 19S4.-C. 200-209.

12    Патоморфологическая характеристика и особенности меланомы кожи. Прогностические факторы // Практическая онкология, № 4, том 8, 2001, с. 23-29.